廢水處理中原生動(dòng)物、輪蟲個(gè)體很小,大部分容易收縮變形,必須在顯微鏡下仔細(xì)觀察其活體的形態(tài)特征,才能正確區(qū)分不同的種類。
1.微型動(dòng)物形態(tài)的顯微觀察
(1)活體顯微觀察,在生物處理裝置轉(zhuǎn)運(yùn)過程中,對(duì)活性污泥和生物膜的生物相,都應(yīng)隨時(shí)予以鏡檢,以觀察其中生物的組成和活動(dòng)情況,并根據(jù)其形態(tài)特征,進(jìn)行種類的鑒定。活體顯微觀察的方法和步驟如下用一小橡皮頭吸管,吸一滴污泥混合液,放在潔凈的載玻片的中央,然后用鑷子取一潔凈的蓋玻片(方形或圓形),先以一邊靠近水滴并與載玻片接觸,緩慢放平,正好將水滴蓋在蓋玻片下面。若水太多,可用吸水紙吸去一些,若水太少,可在蓋玻片邊緣再加少許水樣。要防止蓋玻片下面產(chǎn)生氣泡,影響對(duì)生物的觀察。然后將此玻片移到顯微鏡移動(dòng)臺(tái)上,先用低倍鏡頭觀察,然后換用高倍鏡頭觀察。由于活體動(dòng)物不停地運(yùn)動(dòng),可用移動(dòng)臺(tái)裝置,移動(dòng)載玻片,跟蹤觀察。若須仔細(xì)觀察輪蟲的咀嚼器,可用一根大頭針在顯微鏡下輕輕壓迫蓋玻片,咀嚼器即可從破碎的蟲體中游離而出。原生動(dòng)物口的位置和構(gòu)造,在分類學(xué)上十分重要,必須首先觀察清楚。若認(rèn)清了口的位置,才能區(qū)別蟲體的腹背、左右和前后。原生動(dòng)物的口一般在腹面(有些則在側(cè)面或頂端),故凡與口相對(duì)的一面即為蟲體的背面。以口位于腹面的蟲體為例,若將口部移到視野的前方,并從腹面(即有口的一面)觀察時(shí),則蟲體的左面正是視野的右方,蟲體的右面正是視野的左方(輪蟲亦然)。在觀察過程中,切勿首先使用高倍鏡頭。使用低倍鏡時(shí),用粗調(diào)節(jié)器調(diào)整焦距,換用高倍鏡頭后,調(diào)整焦距必須用細(xì)調(diào)節(jié)器,以免物鏡碰上玻片和水液,損壞鏡頭。鏡頭(物鏡、目鏡)在使用前后,均須用專門的鏡擦紙輕輕指拭,保持其清潔與干燥。
(2)活體染色觀察:原生動(dòng)物是一種單細(xì)胞動(dòng)物,形體小,有些構(gòu)造須經(jīng)過染色才能看請(qǐng)。原生動(dòng)物的細(xì)胞核的形狀和部位與種類的區(qū)分有一定的關(guān)系,這里僅介紹一種細(xì)胞核染色的簡(jiǎn)易方法。用百分之一的甲基綠(methyl green)水溶液可將細(xì)胞核染成綠色。染色時(shí),系用吸管滴一滴染色劑,沿著蓋玻片邊緣徐徐透入其中,染料即可進(jìn)入蟲體內(nèi)部,將細(xì)胞核染成深綠色。如染色太深,可在蓋玻片一側(cè)加一滴清水,在另一側(cè)以吸水紙吸去過多的染液,直至使染色部分清晰為止。此外絲狀菌可用萬分之一的結(jié)晶紫染上顏色,容易觀察。
2.微型動(dòng)物的測(cè)量
在微型動(dòng)物中,原生動(dòng)物和輪蟲個(gè)體甚小,其大小皆以微米為單位。測(cè)量時(shí)系用已校準(zhǔn)之接目測(cè)微尺(簡(jiǎn)稱目尺)在顯微鏡下進(jìn)行計(jì)量的。其方法是將一圓形目尺裝入目鏡的中隔上方,使其適與物象在同一平面上。然后將鏡臺(tái)測(cè)微尺(簡(jiǎn)稱臺(tái)尺)安置在顯微鏡的移動(dòng)臺(tái)上,調(diào)整焦距,使目尺與臺(tái)尺的物相清晰可見時(shí),移動(dòng)臺(tái)尺(系在一毫米的長(zhǎng)度上等分為一百格,每格為10微米),使與目尺之刻線相重合,數(shù)出兩重疊線之間各尺的格數(shù),即可求得一格目尺的微米數(shù)。如在十倍的目鏡(目尺必須裝入其中)與四十倍的物鏡的條件下,測(cè)得兩尺重疊線之間目尺17格適與臺(tái)尺3格重合,則一格目尺的長(zhǎng)度為3(臺(tái)尺)×10微米/17(目尺)=1.764微米,若蟲體之長(zhǎng)等于目尺的30格,則蟲體應(yīng)為:1.764×30=53微米長(zhǎng)。必須注意,在不同放大倍數(shù)的條件下測(cè)量蟲體的大小,必須在不同的放大倍數(shù)下計(jì)算目尺的微米數(shù),才可進(jìn)行測(cè)量,切不可以某一放大倍數(shù)所測(cè)得的目尺微米數(shù)代替另一放大倍數(shù)去進(jìn)行測(cè)量。
3.微型動(dòng)物的簡(jiǎn)易計(jì)數(shù)法
除了活體鏡檢以鑒定微型動(dòng)物的種類外,還有必要對(duì)各種動(dòng)物的數(shù)量及時(shí)進(jìn)行統(tǒng)計(jì),以便分析數(shù)量變化與廢水處理的關(guān)系。由于活性污泥中微型動(dòng)物數(shù)量較多,毋須采用沉淀、濃縮的方法,可以直接計(jì)數(shù)。我們?cè)诖私榻B的簡(jiǎn)易方法只適用于原生動(dòng)物和輪蟲。對(duì)個(gè)體較大的微型動(dòng)物如寡毛類、線蟲等則須加大計(jì)數(shù)容量,以免造成誤差。這種簡(jiǎn)易方法系用一計(jì)數(shù)吸管,吸一滴污泥混合液到載玻片上,進(jìn)行顯微計(jì)數(shù),求出一毫升水樣中的蟲體個(gè)數(shù)。具體作法如下:
(1)計(jì)數(shù)吸管每一滴水體積的標(biāo)定,用一毫升移液吸管,吸一毫升燕溜水(或普通清水)到一清潔的表面皿(或其他玻璃器皿)中,再用一潔凈的橡皮頭小吸管,從表面皿中將一毫升水全部吸盡,然后以均勻的速度徐徐滴下,記下一毫升水的滴數(shù)(不宜用有半
滴水的吸管作計(jì)數(shù)管),并重復(fù)數(shù)次,以免誤差。將計(jì)數(shù)吸管一滴水中之蟲體數(shù)乘以計(jì)數(shù)吸管一毫升水之滴數(shù),即為每毫升之蟲體數(shù)。
(2)顯微計(jì)數(shù);將污泥混合液搖勻后,立即用上述所標(biāo)定的計(jì)數(shù)吸管,取一滴放在載玻片上,以蓋玻片(以方形為好)輕輕蓋好水滴(方法如前),放在低倍鏡下計(jì)數(shù)。先將視野放在蓋玻片的右上角(可根據(jù)各人的習(xí)慣,也可放在另一角),然后以移動(dòng)臺(tái)移動(dòng)載玻片,視野即可隨之從上而下,從右到左通過。當(dāng)前一個(gè)視野數(shù)完,并作好記錄后,再換第二個(gè)視野,如此往復(fù)將整個(gè)蓋玻片下面的動(dòng)物全部計(jì)數(shù)完畢。注意在調(diào)換視野時(shí),不可使前后或左右兩個(gè)相鄰的視野重疊或遺漏,以免產(chǎn)生誤差。原生動(dòng)物中有許多種類是群體,須將群體和群體上的個(gè)體分別計(jì)數(shù)。若用20滴為一毫升的計(jì)數(shù)吸管,取一滴水樣,數(shù)得原生動(dòng)物和輪蟲依次為100個(gè)和5個(gè),則換算成每一毫升中的原生動(dòng)物和輪蟲應(yīng)有2000(100×20)個(gè)和100(5×20)個(gè)。
生物濾池和生物轉(zhuǎn)盤上的生物膜形成膠狀,且濃度較大,計(jì)數(shù)方法須在實(shí)踐中摸索,不妨先試取一定量的生物膜進(jìn)行稀釋計(jì)數(shù)。