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霍夫曼調(diào)制相襯顯微觀察的操作方法

發(fā)布時間:2020-07-08
PMC調(diào)制相襯顯微觀察的操作方法

 PMC調(diào)制相襯顯微觀察的操作方法:

? 用低倍物鏡(如10X)對樣品進(jìn)行聚焦;

? 聚光鏡要定位在正確的工作距離并調(diào)整好光軸中心;

? 調(diào)節(jié)聚光鏡狹縫孔徑,使孔徑帶與物鏡調(diào)制器相應(yīng)區(qū)間對齊;

? 調(diào)節(jié)偏振器,實現(xiàn)顯微圖像襯度變化,適應(yīng)不同折射率相位樣品觀察要求;

盡管PMC對中調(diào)節(jié)是非常簡單地一次性完成,但建議對于初次使用應(yīng)盡量仔細(xì)按照以下方法進(jìn)行儀器調(diào)整,以達(dá)到最佳顯微觀察效果。.

(1) 將聚光鏡系統(tǒng)安裝在倒置顯微鏡上,如圖19所示。安裝時將有刻度標(biāo)識的旋轉(zhuǎn)盤面向操作者,并將聚光系統(tǒng)調(diào)整至刻線位置(見圖5所示),以滿足其正確的工作距離;

(2) 旋轉(zhuǎn)聚光鏡的轉(zhuǎn)盤1 (如圖19) (或移動拉板),將完

MC調(diào)制相襯顯微觀察的操作方法:

? 用低倍物鏡(如10X)對樣品進(jìn)行聚焦;

? 聚光鏡要定位在正確的工作距離并調(diào)整好光軸中心;

? 調(diào)節(jié)聚光鏡狹縫孔徑,使孔徑帶與物鏡調(diào)制器相應(yīng)區(qū)間對齊;

? 調(diào)節(jié)偏振器,實現(xiàn)顯微圖像襯度變化,適應(yīng)不同折射率相位樣品觀察要求;

盡管PMC對中調(diào)節(jié)是非常簡單地一次性完成,但建議對于初次使用應(yīng)盡量仔細(xì)按照以下方法進(jìn)行儀器調(diào)整,以達(dá)到最佳顯微觀察效果。.

(1) 將聚光鏡系統(tǒng)安裝在倒置顯微鏡上,如圖19所示。安裝時將有刻度標(biāo)識的旋轉(zhuǎn)盤面向操作者,并將聚光系統(tǒng)調(diào)整至刻線位置(見圖5所示),以滿足其正確的工作距離;

(2) 旋轉(zhuǎn)聚光鏡的轉(zhuǎn)盤1 (如圖19) (或移動拉板),將完全通光孔置于光路中;

(3) 將偏振器2 安裝在聚光鏡上部的固定軸上,如圖19所示。
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注:一套PMC聚光鏡組件包括聚光鏡、一個或多個狹縫孔徑(如圖20-a)組成, 狹縫孔徑用固定座(如圖20-b)安裝在轉(zhuǎn)盤或拉板上,并將其設(shè)置在聚光鏡的前焦平面上,每一組狹縫孔徑都成像于調(diào)制相襯物鏡的后焦平面,這一點同相位相襯是非常相似的。

(3) 安裝PMC 物鏡,將低倍物鏡轉(zhuǎn)入光路中并對樣品聚焦,當(dāng)聚焦清晰后,再將樣品移出光路,這樣對后續(xù)的聚光系統(tǒng)狹縫孔徑與物鏡調(diào)制器對中調(diào)節(jié)有幫助。

(4) 將聚光鏡轉(zhuǎn)盤旋至通光孔(O)位置,再利用一個對中目鏡(對中望遠(yuǎn)鏡)對物鏡調(diào)制器聚焦(如圖21-a),可以在對中目鏡中觀察到調(diào)制器的像,視場分為三個區(qū)域,分別為黑暗(D)、灰度區(qū)(G)與空白區(qū)(B) (如圖21-a)。注:調(diào)制相襯物鏡也可用于明視場、暗視場、熒光、偏光等,調(diào)制器的方向因物鏡螺紋相對轉(zhuǎn)換器安裝孔的位置不同而呈現(xiàn)不同的方向(如圖.21-b),這需要狹縫聚光鏡的孔徑調(diào)中與之匹配。


(5) 適當(dāng)關(guān)小可變視場光闌1 (如圖.22) ,可以對中目鏡中觀察到光闌像,如果光闌像偏離視場中心,可以通過聚光系統(tǒng)調(diào)中螺釘2 (如圖.22) 調(diào)中,調(diào)整后如圖.22-所示,然后再將可變視場光闌開至最大。

(6)  選擇聚光鏡狹縫孔徑與相匹配的調(diào)制相襯物鏡(如10X PMC 物鏡對應(yīng)10X 狹縫孔徑), 本儀器的狹縫孔徑安裝在固定座內(nèi),可以任意旋轉(zhuǎn),也可進(jìn)行適當(dāng)水平移動,以便于同物鏡調(diào)制器對中。

(7)  利用對中目鏡對狹縫孔徑與物鏡調(diào)制器聚焦,在視場內(nèi)可以觀察到如圖23-a所示的調(diào)制器與狹縫孔徑像,如前所述,由于物鏡是螺紋安裝,因此調(diào)制器的方向是任意的,需要通過狹縫孔徑的旋轉(zhuǎn)與水平移動進(jìn)行調(diào)中。狹縫孔徑像中有兩部分通光區(qū)間,一部分是透射區(qū)(T),另一部分是亮度受偏振器而改變的偏振區(qū)(P)(如圖23-a)。

(8) 旋轉(zhuǎn)狹縫孔徑座,使矩形孔徑的長邊與物鏡調(diào)制器的灰度區(qū)(G)平行,(如圖23-b)。

(9) 水平移動狹縫孔徑座,使透射區(qū)(T)完全進(jìn)入到調(diào)制器的灰度區(qū)(G),偏振區(qū)(P)處于調(diào)制器空白區(qū)(B),見圖 23-c所示。


(10) 旋轉(zhuǎn)聚光系中的偏振器 (如圖.19),注意觀察此時偏振區(qū)的亮度變化,當(dāng)偏振器與狹縫孔徑中的偏振區(qū)平行時,偏振區(qū)(P)具有最大透射率,同時圖像襯度最低,如圖24-a所示,當(dāng)偏振器旋轉(zhuǎn)90度后,與狹縫孔徑中的偏振區(qū)垂直時,即正交,此時偏振區(qū)(P)具有最小透射率,同時圖像襯度最高,如圖24-b所示。

(11)  轉(zhuǎn)換另一個調(diào)制相襯物鏡,同時選擇與之相匹配的狹縫孔徑,按著上述操作方法中的 (8)~(10)進(jìn)行調(diào)整,再將其余物鏡按同樣方法進(jìn)行調(diào)整。.

(12) 取出對中目鏡,換上正常觀察目鏡,便可進(jìn)行調(diào)制相襯顯微觀察。

通過上述調(diào)整后,在視場中可以觀察到呈現(xiàn)三維狀態(tài)的顯微圖像,如圖25所示的硅藻,指紋圖像。為了獲得更加良好的觀察效果,建議可采用單色光,如綠光、藍(lán)光進(jìn)行觀察。.